知识点I琼脂糖凝胶4B、6B、4FF 等 到底有什么区别

Biolinkedin
2023-12-01


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琼脂糖凝胶是由β-D-半乳糖和3,6-脱水-L-半乳糖交替结合所形成的线性多聚糖。利用纯化的琼脂糖热溶液冷却时能凝胶化的特点,可较方便地制成珠状物。在凝胶过程中由单独的多糖链先形成双螺旋,然后聚集成胶束,胶束之间形成微孔,其大小取决于胶束的多少,即琼脂糖的浓度。采用不同浓度的琼脂糖溶液,成球后可得到不同孔径的球状凝胶。最终凝胶结构=琼脂糖凝胶结构。

Sepharose是琼脂糖系中最早的产品,为非交联结构,不能高压灭菌,仅用于2~40℃范围,按琼脂糖含量为2%、4%、6%分成2B、4B及6B三种型号,可用于分离核苷酸类化合物。

当琼脂糖凝胶与2,3-二溴丙醇共价交联可得交联琼脂糖sepharose CL,其热稳定性及物理化学稳定性大大提高,在中性条件下可经120℃消毒并且非特异吸附性小,按琼脂糖含量为2%、4%、6%分成CL-2B、CL-4B、CL-6B三种型号,它们除用于凝胶过滤外,还广泛用作离子交换剂及亲和吸附剂的母体。

琼脂糖凝胶4FF、6FF是高度偶联的琼脂糖凝胶,机械性能大大增强,流速快,适合工业制备生产。化学稳定性高,可用多种促溶剂、有机溶剂操作和1~2M NaOH在位清洗。

琼脂糖凝胶介质:4B(4%琼脂糖)—CL-4B(低强度交联)—4FF(高强度交联),刚性逐渐增强,耐压性提升,但是在交联的过程中部分基团已经被占据,所以可交联上去的配基逐渐减少,制备的介质配基密度逐渐减小。

PS:三者的计量单位为什么不一样?

磁珠是一种纳米或微米级别的微球,分散在分散液中,按质量浓度计算,通过取一定体积的磁珠烘干,称重,得到质量浓度。所以成品按重量计算,一般为10mg/mL,也有50mg/mL。琼脂糖凝胶和琼脂糖磁珠因为含有大量的水分,所以琼脂糖凝胶和琼脂糖磁珠烘干后无法较为准确的计算成品质量浓度,因此成品按体积计算,一般是20%或50%浓度。


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